1、中文名稱：異丙基β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）

2、英文名稱：Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside

3、化學(xué)名稱：異丙基β-D-硫代半乳糖苷

4、分子式：C₉H₁₈O₅S

5、CAS：367-93-1

6、級別：化學(xué)試劑級

7、貨號：    

一、 理化性質(zhì)

1、 結(jié)構(gòu)：

2、性狀：白色晶體粉末

3、純度：≥99%

4、分子量：238.3

5、熔點(diǎn)：110℃-114℃

6、比旋光度：-32°

二、 運(yùn)輸與保存

推薦2-8℃存儲。

三、 使用注意事項(xiàng)

1、含有 IPTG 的培養(yǎng)基 4℃避光保存，須在 1 周內(nèi)使用。

2、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

3、本產(chǎn)品僅作科研用途。

四、 應(yīng)用

1、儲存液配制

①稱取 0.238 g IPTG；加入10 mL去離子水充分溶解，配制 0.1 M 的儲存液；

②用5-10 mL去離子水潤濕0.22μm濾膜；

③上述 IPTG 溶液用0.22μm濾膜除菌，分裝成 1 mL，-20℃冷凍保存。

2、 藍(lán)白斑篩選

IPTG是β-半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)。基于這個(gè)特性，當(dāng)pUC系列的載體DNA（或其他帶有l(wèi)acZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí)，如果在平板培養(yǎng)基中加入X-gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互補(bǔ)性，可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有l(wèi)ac或tac等啟動子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

（1） X-Gal、IPTG 加入瓊脂培養(yǎng)基溶液

①高壓滅菌已加瓊脂的培養(yǎng)基，并冷卻到 50℃左右。

②每毫升培養(yǎng)基內(nèi)加入 10μL 20 mg/mL X-gal 溶液、10μL 0.1 M 的 IPTG（使其終濃度達(dá)到 1 mM）；

③加入適量抗生素；

④混勻后按照平板大小倒入適量培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷卻至室溫后，接種細(xì)菌于 37℃過夜培養(yǎng)。

（2）X-Gal、IPTG 加到瓊脂平板表面

①于無菌超凈工作臺制備平板（如LB瓊脂板）；

②取40μL 0.1 M IPTG和120μL 20 mg/mL X-gal 混合，均勻地涂布于準(zhǔn)備好的平板上；

備注：平板邊緣較難充分涂布均勻，容易產(chǎn)生假陽性，因此，為了得到更好結(jié)果，建議后續(xù)操作中盡可能在平板中間挑取單克隆。

③37℃孵育直至所有液體被吸收（30 min 或更長）。接種細(xì)菌于 37℃過夜培養(yǎng)直到菌落形成。

④根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色，方便地挑選出基因重組體（白色為具有DNA插入片段的基因重組體）。